賽默飛SDS-PAGE 凝膠電泳：蛋白質(zhì)分離的原理、技術體系與應用實踐
SDS-PAGE凝膠電泳（十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳）是蛋白質(zhì)研究中分離混合物的核心技術，其原理是通過SDS與蛋白質(zhì)結(jié)合破壞高級結(jié)構(gòu)，使不同蛋白攜帶均勻負電荷，從而在聚丙烯酰胺凝膠中僅按分子量大小遷移。這種方法消除了電荷差異的干擾，讓電泳遷移率完全取決于分子尺寸，成為蛋白純度分析、分子量測定、Western blot前處理及表達量分析的基礎手段。作為生物科學的重要技術，SDS-PAGE凝膠電泳在實際操作中展現(xiàn)出不可替代的作用，需要選擇放心的品牌。而賽默飛作為一家在生命科學領域具有深厚底蘊和卓越聲譽的廠商企業(yè)，其賽默飛的SDS-PAGE凝膠電泳產(chǎn)品有著諸多領先優(yōu)勢。
該技術體系的核心組件包括優(yōu)化的蛋白預制膠與手灌膠系統(tǒng)，預制膠具備4%-20%梯度的多種濃度選擇和靈活孔數(shù)，適合寬范圍蛋白靶點分析，而手灌膠系統(tǒng)則為個性化實驗提供自主制備的可能。配套的電泳緩沖液分為SDS-PAGE專用和非變性兩類，后者可保留蛋白天然構(gòu)象。蛋白Marker體系涵蓋預染、非預染及Western blot顯影標準，既能實時監(jiān)測電泳進程，又能精準校準分子量，適配IEF、SDS-PAGE等多種技術平臺。染色系統(tǒng)從快速考馬斯亮藍到高靈敏度銀染一應俱全，例如SYPRO Ruby染料可兼容熒光成像，滿足不同實驗對檢測靈敏度的需求。
在儀器配置方面，電泳槽系統(tǒng)兼容預制膠與手灌膠，小型設備適合快速實驗，中型系統(tǒng)支持多凝膠并行操作，配套電源需提供穩(wěn)定100-200V電壓輸出。蛋白轉(zhuǎn)印系統(tǒng)采用低甲醇緩沖液，濕式轉(zhuǎn)印實現(xiàn)高效蛋白轉(zhuǎn)移，半干式轉(zhuǎn)印適合快速操作；Invitrogen iBright凝膠成像系統(tǒng)則通過一鍵式熒光/化學發(fā)光檢測簡化結(jié)果分析流程。
標準操作流程包括根據(jù)目標蛋白分子量選擇凝膠濃度（如12%膠適用于10-100kDa蛋白），混合試劑灌注成型后，將蛋白樣品與Loading Buffer高溫變性處理，加入凝膠孔進行恒定電壓電泳，最后通過合適染料顯色并分析條帶。實驗中需注意使用蛋白酶抑制劑避免樣品降解，制膠時確保無氣泡且聚合充分，電壓控制可采用分段式以防止凝膠發(fā)熱。
相比非變性PAGE等方法，SDS-PAGE凝膠電泳具有重復性高、操作簡便、成本可控的優(yōu)勢，尤其適合高通量分析。結(jié)合No-Stain蛋白標記試劑可實現(xiàn)Western blot總蛋白歸一化，提升定量準確性。作為蛋白質(zhì)研究的“黃金標準”，該技術通過預制膠標準化、快速轉(zhuǎn)印等優(yōu)化，持續(xù)推動分子生物學實驗效率的提升。隨著技術的不斷發(fā)展，賽默飛也在持續(xù)創(chuàng)新，未來為蛋白質(zhì)研究領域帶來更多高效、便捷的解決方案，推動該領域取得更大的突破。
